牛精液冷凍保存

牛精液冷凍保存是將精液進行特殊處理，保存在超低溫下，以達到長期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。MVE液氮罐

牛精液冷凍保存的優(yōu)點：使用不受時間、地域以及種用雄性動物壽命的限制。可充分提高利用率。

低溫保存細胞的原理，冷凍保護劑可以均勻充分地和細胞相接觸，保護效果好。對組織而言，保護劑只能作用于其表面，對深層細胞無法起到保護作用。為了提高組織的存活率，應(yīng)同時控制降溫的速率。控制降溫速率的慢速降溫可以使細胞外溶液中的水結(jié)冰，導(dǎo)致細胞外溶液濃度升高，胞內(nèi)水向膜外滲出，在達到一定溫度時，將組織置于灤低溫冰箱或液氮中凍存，可以減輕細胞內(nèi)結(jié)晶對細胞的損傷，保持細胞的活性。

冷凍

在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng)，距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng)，滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘，當(dāng)精液顆粒顏色變白時，立即浸入液氮，并將全部顆粒取下，收集于儲精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi)，并做好標(biāo)記，然后立即移入液氮罐中儲存。

解凍

將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升，放入干凈的小試管中，再置于40℃左右的溫水杯中，迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動至化凍時，從水杯中取出試管，接著檢查精液活力，即為合格品。

重視保精、快速解凍與鏡檢

1、根據(jù)液氮罐的性能要求，定期添加液氮，罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。

2、取精時，盡可能用長鑷子，切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右)。

3、從液氮中取出細管凍精時，要輕輕甩一兩下，將塑料細管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中，把封口端留在水外3厘米外，待管內(nèi)精液融化一半時，立即取出備用。

4、解凍后的精液鏡檢時，精子的活力不低于標(biāo)準方可用于輸精，才能確保正常受精。

5、解凍后的精液應(yīng)立即輸配，不宜停放時間過長，應(yīng)做到現(xiàn)解凍，現(xiàn)輸精。MVE液氮罐